CHO無血清培養基

簡要描述:
CHO無血清培養基,無血清,低蛋白; 采用批次培養,CHO最大生長密度可達9E6cells/mL;CHO細胞自接種開始至培養最高密度僅需要3-4天; 培養基適合多種不同來源的CHO細胞株(如Lonza來源的GS-CHO細胞和Gibco來源的CHO-S; 既適合重組蛋白生產用途,也適用于重組蛋白研究用途。

產品描述


【CHO無血清培養基   用途與描述】
培養基適合多種不同來源的CHO細胞株,如用于Lonza來源的GS-CHO細胞的培養及重組蛋白生產,也可用于Gibco來源的 CHO-S 細胞的培養及重組蛋白生產。既適合重組蛋白生產用途,也適用于重組蛋白研究用途。

   CHO無血清細胞培養基     NC0302      1000ml/瓶      2-8°C保存     效期12個月

(特別說明:本產品不含 L-谷氨酰胺,對于非GS系統的細胞,使用時需加入終濃度為4 mM 的 L-谷氨酰胺。不含次黃嘌呤和胸苷(HT),在培養二氫葉酸還原酶缺陷型(dhfr-)細胞時需要額外添加,推薦添加濃度為13.6 mg/L的次黃嘌呤與3.87mg/L的胸苷。)

【CHO無血清培養基   產品優勢】
1.無血清,低蛋白;
2.采用批次培養,CHO最大生長密度可達9.0x106cells/mL;
3.CHO細胞自接種開始至培養最高密度僅需要3-4天;
4.培養基適合多種不同來源的CHO細胞株。
 
【CHO無血清培養基   產品性能】


 一、GS-CHO細胞株在Yocon培養基及Hyclone培養基的生長對比數據 

細胞株:所用CHO細胞株為LONZA公司來源的生產級別的工程細胞株;
對照培養基:為Hyclone公司的HyCell CHO培養基,產品貨號為SH30934;
培養形式:采用125mL搖瓶批次培養的方式,培養條件為5%CO2,轉速為120r/min。

 

 


最大生長密度:Yocon培養基中,第4天達到最大生長密度 9.08x106cells/mL
                  
 Hyclone培養基中,第6天達到最大生長密度1.118x107cells/mL。
細胞倍增時間:Yocon培養基中,第4天即達到了細胞密度峰值;
                    
Hyclone培養基中,第6天達到 細胞密度峰值。
   
細胞活率:培養過程中,細胞活率穩定維持在90%以上


二、CHO-S細胞株在Yocon培養基及Hyclone培養基的生長對比數據 

細胞株:所用CHO細胞株為Gibco公司來源的CHO-S空白細胞株;
對照培養基:為Hyclone公司的HyCell CHO培養基,產品貨號為SH30934;
培養形式:采用125mL搖瓶批次培養的方式,培養條件為5%CO2,轉速為120r/min。

 

 


最大生長密度:Yocon培養基中,第4天達到最大生長密度 9.15x106cells/mL;
                   Hyclone培養基中,第5天達到最大生長密度1.113x107cells/mL。
細胞倍增時間:Yocon培養基中,第4天即達到了細胞密度峰值;
                   
Hyclone培養基中,第5天達到 細胞密度峰值。
   
細胞活率:培養過程中,細胞活率穩定維持在90%以上
 


三、GS-CHO細胞,從其他培養基轉入Yocon培養基連續傳代情況 

GS-CHO細胞從Hyclone的培養基中培養,后接種至Yocon培養基中進行培養: 


GS-CHO細胞,轉入前HyCell CHO培養基的生長狀態,可見有一定比例的“巨型細胞”。GS-CHO細胞,轉入Yocon培養基后生長狀態,細胞大小相對均勻,圓潤透亮,分散良好。


GS-CHO細胞從Hyclone的培養基中培養,后接種至Yocon培養基連續培養4代,細胞生長持續穩定: 

 

四、CHO-S細胞,從其他培養基轉入Yocon培養基連續傳代情況 


CHO-S細胞從Hyclone的培養基中培養,后接種至Yocon培養基中進行培養: 

CHO-S細胞,轉入前HyCell CHO培養基的生長狀態,細胞大小不均勻,有碎片。CHO-S細胞,轉入Yocon培養基后生長狀態,細胞大小相對均勻,圓潤透亮,分散良好。


CHO-S細胞從Hyclone的培養基中培養,后接種至Yocon培養基連續培養4代,細胞生長持續穩定:     

    

 

客戶問答

 客戶經常提問的問題                                          
Q: 使用CHO無血清培養基較傳統血清培養基有哪些優勢?
A: 傳統血清培養基中加入了動物血清,首先血清的價格高昂,其次血清的成分十分復雜,很多成分不明晰,而且由于來源問題,批間差異很大,很可能存在病毒、支原體等微生物的污染會對后期實驗帶來損失;CHO無血清培養基采用血清替代成分,避免了使用血清帶來的問題,成本也更低、更加安全,為后期工作提供了便利。

Q: 使用Yocon CHO無血清培養基培養細胞的生長情況如何?
A: Yocon無血清培養基培養的細胞形態規則、分散良好、生長速度快,培養4天左右可達到高細胞密度可以達到9e6cells/mL,不同細胞株高密度可能有所不同,細胞活率在90%以上。

Q: 以前使用培養基加血清的方式或使用其它品牌無血清培養基,可以直接轉到Yocon無血清培養基中培養嗎?
A: 通常情況下,在傳統血清培養基中培養的CHO細胞或者在其他無血清培養基中培養的CHO細胞可以直接傳代至Yocon CHO培養基中進行培養。個別情況下,直接替換為Yocon CHO培養基后細胞不能正常生長,具體表現為傳代后細胞狀態變差,死亡率逐漸變高,形態不再呈現規則的圓形。這種情況下,建議改用逐步替換的方法,具體操作見操作注意事項:細胞適應方法。

Q: 使用CHO無血清培養基培養細胞時細胞接種密度多少合適?
A: 推薦接種細胞密度為0.3-0.5e6 cells/mL,實際測試接種密度可以低至0.15e6 cells/mL,但此密度下細胞前期生長需要一定時間,為避免時間的浪費,不建議接種密度過低,最佳接種密度為推薦濃度。

Q: 為什么我試用你們公司的培養基,細胞大密度達不到9e6cells/mL?
A: 一般加血清的方式培養或使用其它品牌無血清培養基培養的CHO細胞在換用Yocon無血清培養基的過程中,可以實現直接替換(即細胞直接轉入到我們培養基中可以正常生長)。但是“直接替換”并不等同于“完全適應“。更換后第一代,細胞先需要適應新的培養環境,并不能立即體現出其實際的培養性能。更換為我們培養基中后,連續傳代2-3次,一方面可以去除原培養基殘留影響,另一方面細胞可以完全適應至我們的培養基,即可實現高密度。

Q: 為什么我的CHO細胞在長至大密度后再次接種,其生長會變差?
A: 細胞在達到大生長密度的時候已經不是處于最佳生長狀態,實際這時候有些細胞實際已經開始衰退。所以在大密度傳代,細胞接種后并不能表現出良好的生長狀態,往往需要2-3天的時間逐漸恢復。要保證種子細胞一直處于良好狀態,一定要在其處于對數生長期時進行傳代。

 

 

 

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